PRACTICA 10: ESCRUTINIO DE ANTICUERPOS IRREGULARES.

PRACTICA NUMERO 10

27/11/17

OBJETIVOS:

Detectar la presencia de anticuerpos irregulares mediante las pruebas de salino inmediato y proteico inmediato.

UTILIDAD CLINICA:

El objetivo de esta práctica es enfrentar un suero problema con hematíes test de fenotipo conocido con objeto de detectar la presencia de anticuerpos en el suero, de los cuales se conocen con exactitud los antígenos presentes en su membrana, y aplicando técnicas de aglutinación salina y test de Coombs indirecto determinaremos dichos anticuerpos.

De este modo se detectan anticuerpos completos Ig M e incompletos Ig G.

FUNDAMENTOS:

Los anticuerpos irregulares o aglutininas irregulares son anticuerpos anti glóbulos rojos. Están presentes en algunas personas que no tienen el antígeno correspondiente en la superficie de sus glóbulos rojos. Una persona Rh negativa no debería tener efectos anticuerpos anti-Rh. Su presencia es posible después de recibir una transfusión o después de dar a luz a un hijo Rh positivo. Su búsqueda es sistemática en el caso de transfusión de sangre y en mujeres embarazadas Rh- negativas para poder detectar una incompatibilidad materno fetal.

APARATAJE:

Centrifugadora:

Baño maria:

MATERIALES:

-Tubos de hemolisis.

-Pipetas automaticas y puntas de pipeta.

-Suspension de hematies al 2 %.

-Suero del paciente.

REACTIVOS:

-Albumina.

PROCEDIMIENTO

-Añadimos a un tubo 2 gotas de suero problema + 2 gotas de los hematíes test. (Salino inmediato). Luego, incubamos a tª ambiente durante 30 minutos, mezclamos y centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minutos.
-Añadimos a otro tubo 2 gotas del suero problema + 2 gotas de hematíes test + 2 gotas de albúmina. (Proteico inmediato). Luego, incubamos a 37 ºC durante 30 minutos, mezclamos y centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minutos.

-Observamos la presencia de aglutinación en los tubos. La presencia de aglutinación indica un resultado positivo y el suero posee anticuerpos irregulares.

-Si en los tubos no se observa aglutinación hacemos un Coombs para detectar la presencia de anticuerpos. Para ello añadimos 2 gotas de antiglobulina y centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minuto.

-Si observamos la presencia de aglutinación al realizar el Coombs, es un resultado positivo y significa que poseemos anticuerpos irregulares. En caso negativo nuestro suero problema no posee anticuerpos irregulares.

RESULTADOS:

Nuestro resultado ha sido negativo, es decir, al resuspender el botón hemático no hemos observado aglutinación alguna, por lo que el suero problema no posee anticuerpos irregulares..