PRACTICA 11: PRUEBAS CRUZADAS

PRACTICA NUMERO 11

1/12/2017

OBJETIVOS:

El objetivo es detectar los posibles anticuerpos que se hallen fijados a la membrana de los hematíes con antiglobulina humana.

FUNDAMENTOS:

Esta prueba sirve para determinar la compatibilidad sanguínea enfrentando el suero del receptor con los hematíes del donante. (Prueba cruzada mayor).

APARATAJE:

-Centrifuga.

MATERIALES:

• Pipetas
• Centrifuga
• Tubos de ensayo y gradilla
• Vaso precipitado

REACTIVOS:

• Antiglobulina humana
• Suspensión de hematíes (donante)
• Suero (receptor)
• Solución salina fisiológica
• Albúmina

PROCEDIMIENTOS:

-En el primer tubo (tubo salino) añadimos 2 gotas de suspensión de hematíes al 2% y 2 gotas del suero e incubamos a tª ambiente durante 30 minutos.
-En el segundo tubo (tubo proteico) añadimos 2 gotas de suspensión de hematíes al 2%, 2 gotas del suero y 2 gotas de albúmina e incubamos a 37 ºC durante 30 minutos.

-Transcurrido el tiempo centrifugamos los dos tubos a 1000 rpm durante 1 minuto.

-Si en el primer tubo (salino) hay aglutinación es que las dos muestras son incompatibles y si no existe aglutinación son compatibles.

-Si en el tubo proteico existe aglutinación la muestra no es compatible, pero si no existe aglutinación hay que confirmarlo, para ello:

-Lavamos 3 veces con solución salina y a continuación añadimos 2 gotas de antiglobulina (Coombs).

-Centrifugamos 1000 rpm durante 1 minuto y vemos el resultado.

 

-Si existe aglutinación las dos muestras son incompatibles y si no existe aglutinación son compatibles.

RESULTADOS:

Resuspendemos el botón hemático después de centrifugar y observamos la aglutinación.

Tubo salino después de centrifugar

Tubo proteico después de añadir el Coombs y centrifugar

Como se observa en la imagen no existe aglutinación en ningún tubo (los dos estaban iguales), lo que quiere decir las dos muestras son compatibles.

OBSERVACIONES:

Pueden transfundirse sangre.