PRACTICA 15: PT

PRACTICA NUMERO 15

24/01/2018

OBJETIVOS:

Determinación del tiempo de Protrombina.

UTILIDAD CLINICA:

Tromboplastina cálcica de alta sensibilidad para la determinación del Tiempo de Protrombina, para la evaluación de la vía extrínseca de la coagulación y para el control de la terapia Anticoagulante Oral en plasma humano citratado.

FUNDAMENTOS:

Basado en el test de A.Quick, el ensayo mide el tiempo transcurrido hasta la formación del cóagulo después de la mezcla del plasma con Trombloplastina (un extracto de tejido rico en Factor Tisular, fosfolípidos y calcio). La coagulación se inicia por activación del FVII con Factor Tisular.

APARATAJE:

• Coagulometro o cronometro.
• Baño Maria a 37ºC.

REACTIVOS:

• -PT: Tromboplastina de cerebro de conejo, cloruro cálcico, inhibidor de heparina, tampón y conservantes. Liofilizado.

MATERIALES:

• -Pipeta y puntas de pipeta.
• -Tubos de ensayo.

PROCEDIMIENTO:

1. Primero prepararemos el RT, para ello disolvemos un vial  “R” junto con 4 mL de agua destilada.

2.A continuación , calentamos la muestra y el RT (Tromboplastina cálcica) a 37 ºC.

3.Añadimos una bolita  metálica al tubo con la muestra en el  coagulómetro, que será la que vaya girando hasta que se forme el .

4.Mezclamos el RT y añadimos 200 ul en la cubeta del coagulómetro.

5.Incubamos a 37 ºC durante 5 minutos.

6.Pipeteamos 100 ul de plasma.

7.Inmediatamente el coagulómetro se pondrá en funcionamiento y contabilizará el tiempo hasta el coagulo se forme.

RESULTADOS:

El tiempo de coagulación fué y 21,8 segundos, por lo que es un valor que se encuentra un poco por encima de lo normal (13-17 segundos).

Para reviar el instrumental, la técnica y los reactivos también se realizaron los siguientes controles:

-Plasma calibrador coagulación: 12 Segundos.

-Plasma control normal: 12,8 Segundos.

-Plasma control patológico: 33,7 Segundos.

OBSERVACIONES:

Para preparar la muestra para la técnica se debe preparar nueve volúmenes de sangre venosa deben ser mezcladas con un volumen de citrato trisódico. Despues centrifugar la muestra a 2500 rpm durante 15 minutos y tranferir el plasma a contenedores de vidrio.