PRACTICA 24: RECUENTO DE LEUCOCITOS Y HEMATIES.

PRACTICA NUMERO 24

02/03/2018

OBJETIVOS:

Consiste en hacer el recuento en una dilución de sangre entera anticoagulada. Es un método poco usado debido al elevado error que presenta.

FUNDAMENTOS:

La técnica consiste en diluir sangre anticoagulada con EDTA , en líquido de Turck y el recuento de las células mediante hemocitómetro o cámara de recuento utilizando un microscopio óptico.

Para calcular el valor total de recuento tendremos en cuenta la dilución usada , el área contada y la altura de la cámara utilizada.

APARATAJE:

• Microscopio.

REACTIVOS:

• Líquido de Turck (2mL ácido acético glacial,que rompe los hematíes;  1mL de violeta de genciana, que tiñe el núcleo de los leucocitos al 1% y 100 mL de agua destilada).

MATERIALES:

• Tubos eppendorf
• Pipetas de 20 microlitros
• Cámara de Neubauer
• Sangre anticoagulada o capilar
• Papel de filtro

PROCEDIMIENTO:

1.Preparamos un tubo eppendorf con 0,38 ml de líquido de Turck.

2.Pipeteamos 20 μL de sangre en el tubo eppendorf. Haremos  una dilución 1/200.

3.Tapamos el tubo y mezclamos suavemente .

4.Montamos la cámara,llenándola por capilaridad (sobre unos 10 μL).

5.Dejamos reposar durante 5 minutos para que sedimenten los leucocitos.

-Contar los leucocitos presentes en 16 cuadros , de los 4 cuadros grandes situados en las esquinas de la cámara.

Contaremos solo los leucocitos que se situen sobre las líneas superior y derecha.